iTRAQ/TMT 相对定量蛋白组

技术介绍

同重同位素标记的相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术由 AB SCIEX 于 2004 年研发推出的一种多肽体外标记技术。

技术原理

iTRAQ 标记试剂共有 8 种标记,每种标记都包含报告基团、质量平衡基团和多肽反应基团,它们的分子量之和相等,因此不同标记的样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在经过二级质谱时,质量平衡基团丢失,而报告基团在二级质谱低质量区产生不同的报告离子,根据报告离子的信号强度值可获得样品间相同肽段的定量信息。目前 iTRAQ 可同时比较多达 8 组样品的蛋白质表达差异。而由 Thermo Fisher 推出的同款原理相同的产品 TMT(Tandem Mass Tag)最多可同时标记分析 10 个样品。

优势

灵敏度高:可以检测出低丰度蛋白;

通量高:同时对 8 个(TMT10 个)样本进行分析;

结果可靠:通过一批次上机,定性定量结果更加可靠;

自动化程度高:液相与质谱连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。

服务流程

样本要求

细胞:5×10 个细胞

动物组织:200mg

植物组织:800mg

微生物:400mg

血清血浆:300ul