建立在传统基因打靶技术之上的TurboKnockout基因敲除技术,不仅具有传统ES打靶技术成熟、修饰准确、效果稳定等优点,更是使得传统ES打靶技术减少两代繁育时间,制作周期缩短至仅需6个月。在核酸酶技术(TALEN/Cas9)尚未成熟之前,TurboKnockout技术将是研究者最佳的选择。
传统ES打靶基因敲除:构建周期长达12个月,存在嵌合体阶段
传统ES打靶基因敲除因嵌合体阳性率较低,并且需要与工具鼠交配才能获得删除Neo的杂合子,因此构建周期长达10-12个月。如何跨越“嵌合体”阶段并自删除Neo以减少两代繁育时间,才是真正快速的关键。
TurboKnockout基因敲除:实现跨越“嵌合体”阶段且自删除Neo,减少两代繁育时间
基于ES打靶技术的TurboKnockout技术采用了独特的建系和基因改造技术,建立了具有高效遗传优势的TurboKnockout ES细胞系,通过特定胚胎发育阶段的显微注射,使TurboKnockout ES细胞100%代替內源ES细胞,从而实现跨越“嵌合体”阶段,把ES打靶构建周期缩短至6-8个月。并且TurboKnockout采用独特的Self-deleting Neo Cassette所获得的TurboKnockout小鼠与任何品系小鼠交配,都可以100%自删除Neo。也就是说,TurboKnockout不仅实现跨越“嵌合体”阶段,还能真正自删除Neo,从而快速获得去除Neo的杂合子小鼠。
TurboKnockout 技术对比:
技术类型 | TurboKnockout | 传统ES打靶 |
---|---|---|
构建周期 | 6个月 | 10-12个月 |
脱靶效应 | 无 | 无 |
跨越“嵌合体”阶段 | √ | X |
实现自删除Neo | √ | X |